液-液相分離（LLPS）作為一種物理化學現象，指的是含有多種成分的液體會根據濃度和其他刺激因素的不同而分離成不同的相：稠相（或凝相）和稀相。這一現象被越來越多的人認為是細胞組織和功能的基本過程。其中，固有無序蛋白（IDPs）在LLPS中扮演著至關重要的角色，它們不僅能夠促進相分離、還能調節凝聚相中蛋白質的動態，并充當固定特定結合伙伴的支架等。
研究LLPS的一個關鍵工具是熒光顯微鏡，它使研究人員能夠直觀地觀察凝聚態的形成和動態，并實時觀察凝聚態內部分子的行為。德國PicoQuant公司提供的高端時間分辨共聚焦顯微鏡，配備了多種用于研究LLPS和分子動力學的配套方法，其中包括 FLIM、FCS、smFRET、FRET成像和各向異性等。
LLPS對細胞成分的組織和功能至關重要，它可導致核仁、應激顆粒和P顆粒等生物分子凝聚體的形成。在分子尺度上，蛋白質結構中的高動態固有無序蛋白（IDPs）或無序區域是這些相變的原因。而在細胞尺度上，這些無膜細胞器在細胞調控、信號傳導和應激反應中發揮著至關重要的作用。
PicoQuant公司提供先進的解決方案，可以用于分子到細胞尺度研究這些錯綜復雜的過程。尤其是單光子計數共聚焦顯微鏡Luminosa為用戶提供了一個獨特的“方法工具箱”，主要用于研究LLPS中從體外系統到活細胞檢測的致密化過程。
單光子計數共聚焦顯微鏡Luminosa? 節省時間，只需專注于您的樣品
? 單分子研究的最佳性能
? 基于Context的直觀工作流程，適用于smFRET、FCS、FLIM等
? 硬件和軟件的增強集成可實現新功能，從而提高可重復性和易用性
? 以最少的用戶交互獲得可靠的分析結果。
應用文獻
研究synapsin-1的LLPS
FLIM和多點FCS如何揭示生物凝聚物中突觸素-1的行為
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網絡研討會
①簡化smFRET和FCS測量,用于結構生物學和相分離研究
如何將smFRET、FRET成像、FCS、FCCS和時間分辨各向異性結合起來，全面了解固有無序蛋白（IDPs）在液-液相分離（LLPS）期間的行為。
定量單分子和時間分辨熒光技術為動態結構生物學、相分離驅動的細胞機制和病毒學等不同研究領域的許多樣本提供了新的見解。Maria Loidolt-Krüger博士以這些領域為例，展示了如何將單分子FRET (smFRET)、熒光（交叉）相關光譜(F(C)CS)和時間分辨各向異性結合起來，全面了解所研究樣品的情況。
為了獲得可靠的定量結果，需要考慮激光功率或光譜串色等許多因素。我們將以smFRET研究為重點，討論這些因素以及提高實驗準確性和可重復性的方法。最終，體外研究的結果需要與細胞和組織研究聯系起來。Maria展示了如何在細胞中進行FCS測試、從smFRET到FRET成像以及從時間分辨各向異性到各向異性成像來實現這一目標。
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②肉瘤融合蛋白FUS（Fused in Sarcoma）低復雜度域在LLPS期間的行為
了解smFRET、FCS和各向異性揭示了肉瘤融合蛋白FUS（Fused in Sarcoma）低復雜度結構域在LLPS期間的復雜行為。
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